豬ELISA試劑盒具有敏感性高,特異性強,快速等特點,目前廣泛應用于農獸藥、真菌殘留檢測,該方法從加樣、洗板、顯色到讀數步驟繁多,其中任何一步控制不好都可能影響檢測結果的準確性。因此,在實際測定操作中要注意以下幾點。 1.試劑盒回溫
ELISA檢測試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后,先不要急于打開試劑盒,要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水,檢測所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用,提前1~2小時取出試劑盒,放在室溫中;或在預設25℃恒溫培養箱中平衡30分鐘~60分鐘。
2.環境溫度的控制
1)實驗室應配備溫濕度表,且確保定期計量。
2)根據天氣情況設定實驗室空調制冷或加溫功能,待室溫穩定且無干擾的條件下再開始檢測流程。
3)選用帶溫控裝置的孵育儀器,如恒溫孵育器、恒溫培養箱、多功能酶標儀等。注意要提前開啟預熱。
豬ELISA試劑盒的操作方法:
1.包被:在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,然后洗滌。
3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體0.1ml。
4.加底物液顯色:于各反應孔中加入底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5.終止反應:于各反應孔中加入酸0.05ml。
6.結果判定:豬ELISA試劑盒可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或較淺,依據所呈顏色的深淺。