細菌呼吸鏈復合物3(bc-1 complex)活性光度法定量檢測試劑盒產品說明書
(中文版)
主要用途
細菌呼吸鏈復合物3(bc-1 complex)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在使用還原性合成輔酶Q同功類似物和特異性抑制劑,通過反應系統測定樣品中細胞色素C還原后峰值的增高,即采用比色法測定樣品中酶活性的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種野生、培養或病原性細菌膜蛋白懸液樣品的輔酶Q-細胞色素C還原酶的特異性活性檢測。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。
技術背景
細菌呼吸鏈復合物III,通常稱為輔酶Q-細胞色素C還原酶、細胞色素還原酶或bc1復合物(ubiquinol cytochrome c oxidoreductase;cytochrome reductase;bc1 complex),是細菌電子傳遞鏈的中心元素,位于革蘭氏陰性和陽性細菌(除大腸桿菌和古生菌等),包括光合成細菌的細胞膜上,為寡聚體膜蛋白復合物。細菌使用氧氣、氮、硫化物等作為終端電子受體。細菌復合物III含有三個亞單位,包括細胞色素b(Cytochrome b),細胞色素c1(cytochrome c1)和Rieske鐵硫蛋白(Rieske iron-sulfur protein),通過Q循環(Q cycle)進行催化作用。其特征性的酶活性是抗霉素敏感的輔酶Q-細胞色素C還原酶。復合物III催化氧化型細胞色素C被還原為還原型細胞色素C,細菌內電子由低電位的供體還原型泛醌(ubiquinol;UQH2)或還原型輔酶Q(reduced Coenzyme Q;CoQH2)傳遞到細胞色素C或質體藍素(plastocyanin)上的能量轉移反應,進行呼吸鏈傳遞。細菌復合物3和復合物4的相互作用,形成泛醌氧化酶(quinol oxidase)。輔酶Q-細胞色素C還原酶反應系統測定氧化型細胞色素C的濃度變化。基于還原型泛醌或還原型輔酶Q底物,在抗霉素存在與否的情況下,通過輔酶Q-細胞色素C還原酶的催化,轉化成泛醌(ubiquinone;UQ)或輔酶Q(Coenzyme Q;CoQ),同時氧化型細胞色素C,轉化為還原型細胞色素C,在分光光度儀下產生吸光峰值的變化(550nm 波長),由此定量測定輔酶Q-細胞色素C還原酶的特異活性。其反應系統是: