HeLa （ATCCCCL-2） 人宮頸癌細(xì)胞 簡介
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凍存細(xì)胞到貨處理 1、收到細(xì)胞后，檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已揮發(fā)等 問題，請即時(shí)聯(lián)系。 2、將細(xì)胞取出轉(zhuǎn)移至液氮或－80 度冰箱保存，建議盡早復(fù)蘇。 3、復(fù)蘇第一管如有活性狀態(tài)問題及時(shí)與我們聯(lián)系，會有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再復(fù)蘇第 二管。特別說明：未與我方聯(lián)系擅自復(fù)蘇第二管出現(xiàn)問題不予售后。 細(xì)胞復(fù)蘇 1、 從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁； 2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min； 3、棄上清，沉淀用 5ml 培養(yǎng)基重懸，接種 T25 培養(yǎng)瓶，于 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)； 4、第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代 1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí)，棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細(xì)胞一次： 2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后 加入 5ml 培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管 中，1000rpm 離心 5min； 3、棄上清，沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè) T25）， 補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶，最后放入 37℃,5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 細(xì)胞凍存 1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí)，棄 T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細(xì)胞一次； 2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后 加入 5ml 培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管 中，1000rpm 離心 5min； 3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入 1ml/支的富衡無血清凍存液（FH7001），混勻后加入凍存管中。 （如：凍一支，加入 1ml 無血清凍存液） 4、 將凍存細(xì)胞直接放入－80℃冰箱即可；如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，需在-80℃冰箱 存放 24 小時(shí)以上。 本庫的細(xì)胞系（株）僅用于科研工作
